山梨酸、苯甲酸的测定－高效液相色谱法

                            中华人民共和国国家标准

                            GB T 5009.29 2003

                  果品制品－山梨酸、苯甲酸的测定－高效液相色谱法

1 适用范围 

本方法规定了水果汁、果酱等食品中山梨酸、苯甲酸含量的测定方法。

本标准适用于水果汁、果酱等食品中山梨酸、苯甲酸含量的测定。 

2 原理 

样品加温除去二氧化碳和乙醇，调 pH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。 

3 试剂 

方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为蒸馏水或同等纯度水，溶液为水溶液。 

3.1 碳酸氢钠溶液（20g/L）：称取2g碳酸氢钠（优级纯），加水至100mL，振摇溶解；

3.2 稀氨水（1+1）：氨水加水等体积混合； 

3.3 乙酸铵溶液（0.02mol/L）：称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，经滤膜（0.45μm）过滤；

3.4 甲醇：经滤膜（0.5μm）过滤； 

3.5 苯甲酸标准储备溶液：准确称取0.1000g苯甲酸，加碳酸氢钠溶液（20g/L）5mL，加热溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容至100mL，苯甲酸含量为1mg/mL，作为储备溶液； 

3.6 山梨酸标准储备溶液：准确称取0.1000g山梨酸，加碳酸氢钠溶液（20g/L）5mL，加热溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容至100mL，山梨酸含量为1mg/mL，作为储备溶液；

3.7 苯甲酸、山梨酸标准混合使用溶液：取苯甲酸、山梨酸标准储备溶液各10.0mL，放入100mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液含苯甲酸、山梨酸各0.1mg/mL。经滤膜（0.45μm）过滤。 

4 仪器 

高效液相色谱仪（带紫外检测器）。 

5  分析步骤 

5.1 样品处理 

称取5.00～10.0g果汁类样品，用氨水（1+1）调pH约7，加水定容至适当体积，离心沉淀，上清液经滤膜（0.45μm）过滤。 

5.2 高效液相色谱参考条件 

5.2.1 色谱柱：YWG-C18 4.6 mm×250 mm 10μm不锈钢柱。 

5.2.2 流动相：甲醇：乙酸铵溶液（0.02 mol/L）(5：95)。 

5.2.3 流速：1mL/min。 

5.2.4 进样量：10μL。 

5.2.5 检测器：紫外检测器，波长230μm，灵敏度 0.2AUFS。 

根据保留时间定性，外标峰面积法定量。

    (下略)