铜的测定－二乙基二硫代氨基甲酸钠比色法

                           中华人民共和国国家标准

                              GB T15038-94

                葡萄酒、果酒－铜的测定－二乙基二硫代氨基甲酸钠比色法

1 范围

本方法适用于葡萄酒、果酒及其相关产品中铜含量的测定。

2 原理

在碱性溶液中铜离子与二乙基二硫代氨基甲酸钠（DDTC）作用生成棕黄色络合物，用四氧化碳萃取后，比色。

3 试剂 

3.1 硝酸溶液0.5%；

3.2 硫酸溶液（2mol/L）；

3.3 氢氧化钠溶液0.05mol/L；

3.4 氨水（1＋1）；

3.5 乙二胺四乙酸二钠(EDTA)－柠檬酸铵溶液：称取5g乙二胺四乙酸二钠及20g柠檬酸铵，用水溶解并稀释至100mL；

3.6 二乙基二硫代氨基甲酸钠（铜试剂）溶液（1 g/L）：贮于冰箱中；

3.7 四氯化碳；

3.8 铜标准贮备液（1mL溶液含有0.1mg铜）； 

3.9 铜标准使用液（1mL 溶液含有10μg 铜）；

3.10 铜标准系列：吸取铜标准使用液0.00，0.50，1.00，1.50，2.00，2.50mL（含0.0，5.0，10.0，15.0，20.0，25.0μg铜）分别于六支125mL 分液漏斗中，各补加2mol/L硫酸溶液至20mL。然后再加入10mL乙二胺四乙酸二钠－柠檬酸铵溶液和3滴麝香草酚蓝指示液，混匀，用氨水调pH（溶液的颜色由黄至微蓝色），补加水至总体积约40mL，再各加2mL二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液（铜试剂）和10.00mL四氯化碳，剧烈振摇萃取2min，待静置分层后，将四氯化碳层经无水硫酸钠或脱脂棉滤入2cm比色杯中。

3.11 香草酚蓝指示液（1 g/L）：称取0.1g麝香草酚蓝于4.3mL氢氧化钠溶液中，用水稀释至100mL。

4 仪器

4.1 分光光度计；

4.2 分液漏斗：125mL。

5 试样的制备

5.1 干法消化：准确吸取25.00mL 样品（V）于蒸发皿中，在水浴上蒸干，置于电炉上小心炭化，然后移入550±25℃高温电炉中灼烧，灰化至残渣呈白色，取出，加入10mL盐酸溶液溶解，在水浴上蒸至约2mL，再加入5mL 水，加热煮沸后，移入50mL容量瓶中，用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶，加水稀释至刻度（V1），摇匀。同时做空白试验。

5.2 湿法消化：准确吸取1.00mL 样品（V）（视含铁量增减）于10mL凯氏烧瓶中，置电炉上缓缓蒸发至近干，取下稍冷后，加1mL浓硫酸（根据含糖量增减）、1mL过氧化氢，于通风厨内加热消化。如果消化液颜色较深，继续滴加过氧化氢溶液，直至消化液无色透明。稍冷，加10mL水微火煮沸3～5min，取下冷却。同时做空白试验。

6 分析步骤

6.1 标准工作曲线的绘制：置仪器于合适的工作状态下，调波长至440nm 处，导入标准系列溶液，分别测其吸光度，根据吸光度及相对应的铜浓度绘制标准曲线（或建立回归方程）。

6.2 样品的测定：吸取干法处理的试样10.00mL 和同量空白消化液分别于125mL分液漏斗中，或者将湿法处理的全部试样及空白消化液，洗入125mL分液漏斗中。然后按3.10和6.1方法操作（湿法处理的试样，进行3.10步骤时，以水代替2mol/L 硫酸溶液，补加体积至20mL，以后步骤不变），分别测其吸光度，从标准工作曲线上查出铜的含量（或用回归方程计算）。

    (下略)