总糖和还原糖的测定－高效液相色谱法(Ⅱ法)

                          中华人民共和国国家标准

                              GB T15038-94

               葡萄酒、果酒－总糖和还原糖的测定－高效液相色谱法(Ⅱ法)

1 范围

本方法适用于葡萄酒、果酒及其相关产品中总糖和还原糖含量的测定。

2 原理

利用样品中各种组分在液固两相分配系数的不同，令样品通过液相色谱柱，而将样品中的果糖、葡萄糖、蔗糖与其他组分分离。然后再利用示差折光检测器进行鉴定，用外标法定量。

3 试剂与溶液

3.1 乙腈：色谱纯；

3.2 超纯水； 

3.3 乙腈-水（75＋25）：将乙腈和水按（75＋25）的比例混合（或根据仪器情况调整该比例至分离效果最佳），用脱气装置充分脱气后，再用0.45μm 的油系过滤膜过滤。该溶液用做流动相；

3.4 糖标准溶液（含总糖45.000g/L）：分别称取干燥的葡萄糖、果糖、蔗糖各1.500g（精确至0.001g），移入100mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度。该溶液含葡萄糖、果糖、蔗糖分别为15.000g/L。

4 仪器设备

4.1 高效液相色谱仪：（配有记录系统或数据处理装置）；

4.2 示差折光检测器；

4.3 色谱柱：150 min×5.0mm（内径），Shim－pack CLCNH2 柱；

4.4 微过滤膜：0.45μm，油系；

4.5 脱气装置（或超声波装置）。

5 试样的制备

将样品用超纯水稀释至含总糖量为45g/L 左右，并用0.45μm 油系微过滤膜过滤。

6 分析步骤

6.1 色谱条件

a.柱温：室温；

b.流动相：乙腈＋水；

c.流速： 2mL/min；

d.进样量：20μL。

6.2 测量：

在同样的色谱条件下，将糖标准溶液和处理好的试样分别注入色谱仪。开启记录系统后，扳动进样阀。

    (下略)